PROBLEM TO BE SOLVED: To provide compositions and methods for preparing highly concentrated stock solutions of AAV virion without aggregation.SOLUTION: Formulations for AAV preparation and storage are high ionic strength solutions (e.g. μ 500 mM) that are nonetheless isotonic with an intended target tissue. This combination of high ionic strength and modest osmolarity is achieved using a salt of high valency, such as sodium citrate. AAV stock solutions up to 6.4×1013 vg/mL are possible using the formulations of the invention, with no aggregation being observed even after ten freeze-thaw cycles. The surfactant Pluronic [registered trademark] F68 is added at 0.001% to prevent losses caused by binding to the surface of the virion during handling. If a virion formulation is treated with a nuclease, a small nucleic acid strand on the virion surface that exacerbates aggregation can be eliminated.SELECTED DRAWING: NoneCOPYRIGHT: (C)2017,JPO&INPIT【課題】凝集なく、AAVビリオンの高濃度ストック溶液を調製するための組成物および方法が提供される。【解決手段】AAV調製物および保存のための製剤は、意図される標的組織と等張であるとはいえ、高いイオン強度の溶液(例えば、μ~500mM)である。高いイオン強度および適度な浸透圧のこの組合せは、クエン酸ナトリウムのような高い価数の塩を用いて達成される。6.4×1013vg/mLまでのAAVストック溶液は本発明の製剤を用いて実現でき、10回の凍結融解サイクル後でさえ凝集が全く観察されない。界面活性剤Pluronic[登録商標]F68を0.001%で添加し、扱っている間のビリオンの表面への結合による損失を防ぐ。ビリオン調製物をヌクレアーゼで処理すると、凝集を悪化させるビリオン表面上の小核酸鎖が除去され得る。【選択図】なし
