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一种高GC含量基因突变体的创制方法
- 专利权人:
- 山东省农业科学院作物研究所
- 发明人:
- 楚秀生,楮蔚,崔德周,樊庆琦,隋新霞,黄承彦
- 申请号:
- CN201610713524.4
- 公开号:
- CN106318933A
- 申请日:
- 2016.08.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 张红军
- 摘要:
- 本发明提供了一种高GC含量基因突变体的创制方法。本发明利用单引物合成DNA单链,以解决退火过程中引物自身优先配对而不能全部与DNA模板配对的问题。通过混合正向引物合成的DNA单链和反向引物合成的DNA单链,并在95℃使其充分变性解链,在温度自然缓慢下降至室温的过程中,使正向和反向单链DNA进行互补配对,DpnI酶去除模板DNA,最终创制出高GC含量的基因突变体。本发明技术操作简单,可适用于动物、植物、微生物以及人类等GC含量超过70%的高GC含量基因突变体的创制,也非常适合于改变三联体密码子中2个碱基、或3个碱基的基因突变体的创制,应用前景非常广泛。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/