THE BOARD OF REGENTS OF THE UNIVERSITY OF TEXAS SYSTEM
发明人:
ZHANG, Yu,LONG, Chengzu,BASSEL-DUBY, Rhonda,OLSON, Eric
申请号：
USUS2017/063468
公开号：
WO2018/098480A1
申请日:
2017.11.28
申请国别(地区):
US
年份:
2018
代理人:
摘要：
Duchenne muscular dystrophy (DMD) is an inherited X-linked disease caused by mutations in the gene encoding dystrophin, a protein required for muscle fiber integrity. The disclosure reports CRISPR/Cpfl -mediated gene editing (Myo-editing) is effective at correcting the dystrophin gene mutation in the mdx mice, a model for DMD. Further, the disclosure reports optimization of germline editing of mdx mice by engineering the permanent skipping of mutant exon and extending exon skipping to also correct the disease by post-natal delivery of adeno- associated virus (AAV). AAV-mediated Myo-editing can efficiently rescue the reading frame of dystrophin in mdx mice in vivo. The disclosure reports means of Myo-editing-mediated exon skipping has been successfully advanced from somatic tissues in mice to human DMD patients- derived iPSCs (induced pluripotent stem cells). Custom Myo-editing was performed on iPSCs from patients with differing mutations and successfully restored dystrophin protein expression for all mutations in iPSCs-derived cardiomyocytes.La dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) est une maladie héréditaire liée au chromosome X due à des mutations dans le gène codant pour la dystrophine, une protéine nécessaire à l'intégrité des fibres musculaires. L'invention concerne l'édition de gène médiée par CRISPR/cpf1 (Myo-édition) efficace pour corriger la mutation du gène de la dystrophine chez les souris mdx, un modèle pour la DMD. En outre, l'invention concerne l'optimisation de l'édition de lignée germinale de souris mdx par manipulation du saut permanent d'exon mutant et extension du saut d'exon pour corriger également la maladie par administration post-natale de virus adéno-associés (AAV). La myo-édition médiée par AAV peut efficacement restaurer le cadre de lecture de la dystrophine dans des souris mdx in vivo. L'invention concerne un moyen de saut d'exon médié par la myo-édition qui est passé avec succès des tissus somatiques de souris à des SCPi (cellules souch
