本发明涉及一种快速鉴定烟粉虱钠离子通道基因突变L925I的引物及其应用。快速鉴定钠离子通道基因突变位点L925I为野生型烟粉虱的引物,上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;快速鉴定钠离子通道基因突变位点L925I为突变型烟粉虱的引物,上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明采用两对引物进行检测,不仅有助于提高检测的准确率,并且有助于快速、灵敏地检测田间烟粉虱对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性发生发展动态,为抗药性的治理提供技术支持,便于及时调整烟粉虱防治策略,以延缓和控制抗药性的进一步发展。