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一种应用于黑水虻的CRISPR/Cas9基因编辑系统的标记基因
- 专利权人:
- 中国科学院分子植物科学卓越创新中心
- 发明人:
- 黄勇平,王四宝,许军,寇宗庆,詹帅
- 申请号：
- CN201910534976.X
- 公开号：
- CN112111526A
- 申请日:
- 2019.06.20
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种筛选CRISPR/Cas9基因编辑黑水虻的方法，其包括以下步骤：(1)将white基因敲除的模板引物sgRNA1‑F和sgRNA2‑F分别和通用的反向引物进行PCR，将PCR产物回收纯化，即得模板sgRNA；(2)将所述的sgRNA模板进行体外大量扩增，获得单链状态的sgRNA；(3)将所述的单链状态的sgRNA和cas9蛋白混合，显微注射入黑水虻新产受精卵中；(4)将所述注射后的卵黑暗处理，直到孵化，观察孵化出的黑水虻的眼色表型，挑出眼睛白化个体。本发明用基因编辑技术实现了眼色相关基因的成功敲除，获得的基因突变黑水虻可以通过观察是否出现白化眼睛来判断，表型早期易观察，作为标记基因具有优良效果，可以为后续黑水虻基因功能研究提供便捷。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
