本发明公开了表达α1,3半乳糖转移酶的癌细胞/树突状细胞融合肿瘤疫苗及其制备方法。本发明所提供的表达α1,3半乳糖转移酶的癌细胞/树突状细胞融合肿瘤疫苗及其制备方法中,制备融合细胞的方法包括将肿瘤细胞和树突状细胞进行融合得到融合细胞的步骤;所述肿瘤细胞为含有α1,3半乳糖转移酶相关基因并表达α1,3半乳糖转移酶的重组细胞;α1,3半乳糖转移酶相关基因由α1,3半乳糖转移酶基因和GTTI连接而成;所述α1,3半乳糖转移酶基因编码氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质;所述GTTI的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.4的第1位-第548位核苷酸。