The technology described herein relates to methods of making a single-stranded donor nucleic acid for use in genome modification at targeted nicks. Also featured are methods for initiating alternate homology directed modification using single-stranded donor nucleic acids as disclosed herein for efficient targeted gene modification. Aspects of the invention relate to optimized selection or targets and design of the single-stranded donor nucleic acid to result in increased frequency of alternative Homology-Directed Repair (HDR) at nicks in the selected target for efficient genome engineering.La présente invention concerne des procédés de fabrication d'un acide nucléique donneur simple brin destiné à être utilisé dans la modification du génome au niveau de cassures ciblées. L'invention concerne également des procédés permettant de lancer une autre modification dirigée par homologie à l'aide d'acides nucléiques donneurs simple brin tel que décrit ici pour une modification génétique ciblée efficace. Des aspects de l'invention concernent une sélection optimisée ou des cibles et la conception de l'acide nucléique donneur simple brin en vue d'obtenir une fréquence accrue de réparation dirigée par homologie (HDR) au niveau de cassures dans la cible sélectionnée pour une modification génomique efficace.
