The present invention relates to glycosyltransferases, mutants and their applications. Specifically, in the presence of glycosyltransferase, the glycosyl group of the glycosyl group donor is transferred to the hydroxyl group of the C-3 region of the tetracyclic triterpenoid compound; Forming a glycosylated tetracyclictriterpenoid-based compound; Wherein the glycosyltransferase is a glycosyltransferase represented by SEQ ID NO .: 4 or a derivative polypeptide thereof; Or a glycosyltransferase or a derivative polypeptide thereof represented by SEQ ID NO .: 21.본 발명은 글리코실트랜스퍼라제, 돌연변이체 및 이의 응용에 관한 것이다. 구체적으로, 글리코실트랜스퍼라제존재 하에서, 글리코실기 공여체의 글리코실기를 테트라시클릭트리터페노이드계 화합물의 C-3 부위의 히드록실기에 전이시켜; 글리코실화된 테트라시클릭트리터페노이드계 화합물을 형성하는 단계를 포함하고; 여기서, 상기 글리코실트랜스퍼라제는 SEQ ID NO.: 4로 표시되는 글리코실트랜스퍼라제 또는 이의 유도 폴리펩티드; 또는 SEQ ID NO.: 21로 표시되는 글리코실트랜스퍼라제 또는 이의 유도 폴리펩티드인 체외 글리코실화 방법을 제공한다.