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黑鲷肿瘤坏死因子α基因的重组表达方法
- 专利权人:
- 中国科学院海洋研究所
- 发明人:
- 宋林生,蔡中华,高春萍,相建海
- 申请号：
- CN200410050331.2
- 公开号：
- CN1328382C
- 申请日:
- 2004.08.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2007
- 代理人:
- 许宗富`周秀梅
- 摘要：
- 本发明涉及分子生物学技术领域，是黑鲷肿瘤坏死因子α(BS TNFα)基因的体外表达与纯化技术。本发明包括重组表达载体的构建、转化、转化子筛选和表达产物的分离纯化和鉴定等技术环节。其中重组体的构建是根据黑鲷肿瘤坏死因子α预测成熟肽的cDNA序列设计引物，引入两个不同的限制性内切酶突变位点，然后克隆到表达载体，再将构建成的重组表达载体转化大肠杆菌和酵母，筛选阳性克隆并以IPTG或甲醇诱导重组蛋白的表达。利用亲和层析对表达产物进行多级纯化，获得高纯度体外表达的重组肿瘤坏死因子α。该产品可用于鱼类免疫机制的理论研究，也可作为饵料添加剂、免疫增强剂、病害防治药物等在生产方面进行应用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
