This invention refers to compositions and methods comprising improvements in a CRISPR system (e.G. (ca)9 associated with CRISPR (crispr -cas9, non -cas9 CRISPR systems). Can such compositions include modifications to the promoter region H1, addition of modifications 5? Other, different ortological sequences of the promoter H1, new two -way compact promoter sequences with both activity in (ii) and (iii), addition of Kozak consensus sequences, termination sequences, addition of two -way political II /pol III conditional, ad A donor standard sequence to correct mutations,Or combinations thereof. Other aspects of the invention refer to changes to cas9 by means of post -transcriptional cell cycle regulation mergers, modified partial target sites so that nuclease can bind without cleavage of DNA, self -regulatory sites, and termination modifications n to Modulate the half -life.a presente invenção refere-se a composições e métodos compreendendo melhoras de um sistema crispr (por exemplo, (cas)9 associada a crispr (sistemas crispr-cas9, crispr não cas9). tais composições podem compreender modificações à região promotora h1, adição de modificações 5?utr, diferentes sequências ortólogas do promotor h1, novas sequências promotoras bidirecionais compactas tanto com atividade pol ii quanto pol iii, adição de sequências de consenso kozak, sequências de terminação, adição de expressão promotora bidirecional pol ii/pol iii condicional, adição de uma sequência padrão do doador para corrigir mutações, ou combinações das mesmas. outros aspectos da invenção referem-se a modificações a cas9 através de fusões de regulação do ciclo celular pós-transcricional, sítios alvo parciais modificados de modo que a nuclease possa ligar-se sem clivagem de dna, sítios de autorregulação, e modificações de terminação n para modular a meia-vida.
