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一种牛乳铁蛋白肽的制备方法及应用
- 专利权人:
- 中国科学院新疆理化技术研究所
- 发明人:
- 王亮,李晓波,肖向文,陆雪莹
- 申请号：
- CN201510688999.8
- 公开号：
- CN105254718A
- 申请日:
- 2015.10.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 张莉
- 摘要：
- 本发明涉及一种牛乳铁蛋白肽的制备方法及应用，该方法选取氨基酸编码序列NO.1为目标蛋白，然后将氨基酸序列NO.1，转化成核苷酸编码序列NO.2，并在苷酸编码序列NO.2设计并人工合成两条反相互补的寡核苷酸链上下游引物，在上下两条引物的5’端分别引入限制性酶切位点 EcoR I和 Xho I，PCR扩增获得抗菌肽基因片段，分别构建重组表达载体，转化大肠杆菌后诱导表达，超声裂解菌体，SDS-PAGE凝胶电泳检测，融合蛋白GST-LfcinB成功表达，融合蛋白经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化后，经羟胺剪切缓冲液切割融合蛋白，释放抗菌肽。通过琼脂扩散法抑菌实验检测其对大肠杆菌和金色葡萄球菌都具有明显的抑菌活性。克服了牛乳铁蛋白肽分子量较小容易被蛋白酶水解，造成产量低。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
