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一种提取和检测鱼类精子膜蛋白的方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 方弟安,张敏莹,徐东坡,刘凯,周彦锋,段金荣
- 申请号:
- CN201310681572.6
- 公开号:
- CN103694309A
- 申请日:
- 2013.12.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 李纪昌`曹翠珍
- 摘要:
- 本发明公开了一种提取和检测鱼类精子膜蛋白的方法,包括样品的预处理、精子悬液的制作、精子的悬浮处理、精子膜蛋白分离、精子膜蛋白去脂纯化、精子膜蛋白的SDS-PAGE检测以及精子膜蛋白质谱检测的步骤;本方法在传统去污法的基础上,拟合了蛋白酶抑制剂和TM-PEK法的特点,所提取的鱼类精子膜蛋白盖度达到86%以上,平均每5×107个精子中可得到0.6mg膜蛋白和0.8mg胞质蛋白。本发明专利方法的推广应用可以为鱼类精卵作用机制以及受精机理的探明提供基础资料;可以为鱼类的增养殖尤其是江海洄游性鱼类的生殖繁育提供指导;可以为其他水生生物物种的精子膜蛋白研究提供有用的参考方法。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/