本发明公开了一种西妥昔单抗突变体及应用。西妥昔单抗突变体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1~6任一所示。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1~5所示的Cetuximab突变体对EGFR S492R有效,其中抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1、2所示的Cetuximab突变体效果优于Panitumumab。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的Cetuximab突变体对EGFR G465R有效,且效果显著。本发明获得的抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1、2、6所示的Cetuximab突变体仍然保持对野生型EGFR的亲和力。