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一种真菌菌丝总DNA的提取方法
- 专利权人:
- 四川省农业科学院土壤肥料研究所;成都市农林科学院;四川省技术创新促进会
- 发明人:
- 李小林,郑林用,李昕竺,曾先富,黄羽佳
- 申请号：
- CN201410102771.1
- 公开号：
- CN103820434A
- 申请日:
- 2014.03.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 高芸`梁鑫
- 摘要：
- 本发明属于真菌的分子生物学研究领域，具体涉及一种真菌菌丝总DNA的提取方法，具有免液氮研磨又能较为彻底打破细胞壁提取真菌菌丝总DNA的优点，其步骤如下：（1）收集真菌菌丝体；（2）置于DNA提取液中，捣碎；（3）在-80℃的低温环境与65℃水浴环境中反复冻融2～3次；（4）加入蛋白酶K和溶菌酶处理；（5）去酶及纯化DNA。该处理方法简单，所需试剂常见；采用反复冻融、捣碎的方式使样品可免于使用液氮研磨，便于不易获得液氮的地方使用；未使用研钵防止了交叉污染；也避免使用苯酚、β-巯基乙醇等有毒试剂；整个提取过程温和，提取真菌菌丝总DNA质量高，可进行ITS序列PCR扩增及测序等后续分子生物学研究。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
