The invention provides ligation reaction mixtures, methods, and kits for improved template-independent intramolecular ligation (circularization) of linear ssDNA, including denatured gDNA fragments or first-strand cDNA made by reverse transcription of RNA, using, for example, a thermostable RNA ligase. The circular ssDNA molecules obtained using the improved ligation reaction mixtures and methods can be used, for example, as templates: for amplification by inverse PCR, rolling circle replication, transcription, or for massively parallel DNA sequencing. Applications include, for example: gene expression analysis by qPCR or using microarrays analysis of gDNA copy number variation and detection or quantification of specific nucleic acid sequences for research, screening, medical diagnostics, theranostics, personalized medical treatment or breeding, for purposes such as human or animal medicine, forensics, or agriculture.Linvention concerne des mélanges, des procédés et des trousses de réaction de ligature, pour une ligature intramoléculaire améliorée indépendante de la matrice (circularisation) dADNss linéaire, comprenant des fragments dADNg dénaturé ou de lADNc premier brin obtenu par transcription inverse dARN à laide, par exemple, dune ARN ligase thermostable. Les molécules dADNss circulaire obtenues à laide des mélanges et procédés améliorés de réaction de ligature peuvent être utilisées, par exemple en tant que matrices : pour une amplification par PCR inverse, réplication de cercle tournant, transcription ou pour un séquençage dADN massivement parallèle. Les applications comprennent, par exemple : lanalyse de lexpression génique par PCRq ou à laide de microréseaux lanalyse de la variation du nombre de copies dADNg, et la détection ou la quantification de séquences dacide nucléique spécifiques pour la recherche, le criblage, les diagnostics médicaux, la théranostique, le traitement médical personnalisé ou la sélection, à des fins de médecine humaine ou animale, de
