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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症转基因斑马鱼模型的建立方法
- 专利权人:
- 贵州医科大学
- 发明人:
- 舒莉萍,何志旭,周艳华,庹媛媛,夏海雄,崔冬冰
- 申请号:
- CN201610385063.2
- 公开号:
- CN105925607A
- 申请日:
- 2016.06.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 刘楠`李余江
- 摘要:
- 本发明公开了一种葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶缺乏症转基因斑马鱼模型的建立方法,其建立方法包括以下步骤:1)将g6pdM118‑144‑egfp‑PCS2+,gata‑1‑PBSK‑Isce I质粒酶切连接构建了gata1‑g6pdM118‑144‑egfp‑PBSK‑Isce I质粒;2)将gata1‑g6pdM118‑144‑egfp‑PBSK‑Isce I质粒通过显微注射的方式注入1细胞期斑马鱼胚胎动物极胚盘内;3)通过观察24hpf期胚胎是否表达绿色荧光筛选出转基因的胚胎并孵化养至成鱼作为F0代转基因斑马鱼;4)以F0代转基因斑马鱼与野生型交配后产生的表达绿色荧光的胚胎孵化并养至成鱼作为F1代转基因斑马鱼;5)通过观察胚胎EGFP荧光情况和基因组PCR 法鉴定转入的g6pdM118‑144‑egfp基因的表达和插入情况。该方法为这种模型在筛选治疗G6PD缺乏症药物中
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/