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一种高浓度玻璃化液及石斑鱼胚胎超低温冷冻保存方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院黄海水产研究所
- 发明人:
- 田永胜,陈张帆,段会敏,唐江
- 申请号:
- CN201610838985.4
- 公开号:
- CN106417251A
- 申请日:
- 2016.09.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 尚欣
- 摘要:
- 本发明公开了一种高浓度玻璃化液及石斑鱼胚胎冷冻保存方法,所述玻璃化液包括基础稀释液60%、渗透性抗冻剂35%和非渗透性抗冻剂5%;其中所述基础稀释液包括NaCl2 4.72 g/L,CaCl2·2H2O 1.46g/L,KCl 0.865g/L,MgCl2·6H2O 4.86g/L和NaHCO3 0.19 g/L,溶解在蒸馏水中;所述渗透性抗冻剂包括1,2‑丙二醇15.75%、甲醇10.5%和甘油8.75%;所述非渗透性抗冻剂是蔗糖或海藻糖。所述方法包括:高浓度渗透和非渗透性玻璃化液的配制,洗脱液配制,冷冻胚胎时期的筛选,胚胎五步渗透平衡,胚胎快速冷冻保存,胚胎解冻、洗脱和培养。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/