The present invention relates to a composition for cryopreservation of lactic acid bacteria including pumpkin powder, sucrose, and skimmed milk, a lactic acid bacteria cryopreservation agent, and a method for cryopreserving the lactic acid bacteria by treating the lactic acid bacteria with the lactic acid bacteria cryopreservation composition while preventing damage. According to the present invention, the composition for cryopreservation of lactic acid bacteria including pumpkin powder, sucrose, and skimmed milk to be used as a cryopreservation agent has excellent lactic acid bacteria cryopreservation performance compared to a conventional cryopreservation agent in a cryopreservation process for preserving the lactic acid bacteria for an extended period of time when preparing various lactic acid bacteria as probiotics, thereby ensuring a high survival rate of lactic acid bacteria after a freeze-drying operation and the safety as an ingredient for a food product. The composition for cryopreservation of lactic acid bacteria including pumpkin powder, sucrose, and skimmed milk can be used to maximize the survival rate of lactic acid bacteria after the freeze-drying operation to enable the production of the high-quality probiotics, make the quality of the probiotics uniform, and supply the lactic acid bacteria, as strains for maintaining quality, at low cost.본 발명은 호박분말, 자당 및 탈지유를 포함하는 유산균 동결 보존용 조성물, 유산균 동결 보존제 및 상기 유산균 동결 보존용 조성물을 유산균에 처리하여 이를 동결 보존 및 손상을 방지하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 동결보존제로 사용하는 호박분말, 자당 및 탈지유를 포함하는 동결 보존용 조성물은 다양한 유산균을 프로바이오틱스로 제조함에 있어서 그 유산균의 장기 보존을 위한 동결 건조 과정에서의 유산균의 동결보존 효과가 종래의 동결보존제에 비해 매우 뛰어나 동결 건조 후 유산균의 생존율이 높을 뿐 아니라, 식품등급의 재료로서 안정성을 제공한다. 따라서, 본 발명의 호박분말, 자당 및 탈지유를 포함하는 동결 보존용 조성물을 이용하면 유산균의 동결건조 후 생존율을 극대화시켜 고품질 프로바이오틱스의 생산을 가능하게 하며, 프로바이오틱스 품질 균일화 및 품질 유지를 위한 종균으로서의 유산균을 낮은 단가로 공급할 수 있다.