GONG, Guochun,LAI, Ka-Man, Venus,VALENZUELA, David, M.
申请号:
USUS2013/072088
公开号:
WO2014/085501A1
申请日:
2013.11.26
申请国别(地区):
WO
年份:
2014
代理人:
摘要:
Genetically modified somatic cells of a non-human animal are provided that are engineered to contain a self-excisable, recombinase expression cassette comprising a site- specific recombinase gene operably linked to an ES cell-specific promoter. Compositions and methods for producing a genetically modified, cloned non-human animal that is free of a selective marker gene and a recombinase gene are provided, wherein a targeting construct comprising a self-excisable recombinase gene operably linked to an ES cell-specific promoter is introduced into differentiated somatic cells. The genetically modified genome of the somatic cells is transferred into an enucleated host oocyte. The artificially created zygote is then cultured in vitro until the blastocyst embryonic stage and subsequently implanted into a uterus of a surrogate mother to form a genetically modified, cloned non-human animal free of selective marker and recombinase genes.Linvention concerne des cellules somatiques génétiquement modifiées dun animal non humain qui sont génétiquement modifiées pour contenir une cassette dexpression de recombinase, auto-excisable, comprenant un gène recombinase spécifique dun site lié fonctionnellement à un promoteur spécifique dune cellule ES. Linvention concerne des compositions et des procédés de production dun animal non humain cloné génétiquement modifié qui est dépourvu dun gène marqueur de sélection et dun gène recombinase, une construction de ciblage comprenant un gène recombinase auto-excisable lié fonctionnellement à un promoteur spécifique dune cellule ES étant introduite dans des cellules somatiques différenciées. Le génome génétiquement modifié des cellules somatiques est transféré dans un ovocyte dhôte énucléé. Le zygote artificiellement créé est ensuite mis en culture in vitro jusquà ce que le stade embryonnaire blastocyste et est implanté ultérieurement à lintérieur dun utérus dune mère porteuse pour former un animal non humain cloné, génétiquement modifié, dépou