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一种新的定向进化技术SNDS及所获得耐热高效甲基对硫磷水解杂合酶
- 专利权人:
- 中国农业科学院生物技术研究所
- 发明人:
- 初晓宇,伍宁丰,王平,罗晓亮,田健
- 申请号：
- CN201610950778.8
- 公开号：
- CN106544331A
- 申请日:
- 2016.10.26
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 霍雪梅`余光军
- 摘要：
- 本发明公开了一种新的定向进化技术SNDS及所获得耐热高效甲基对硫磷水解杂合酶。本发明以两个亲本酶基因的互补单链DNA为出发序列分别进行酶切消化，消化后产物不经回收直接混合进行无引物PCR、构建突变体库并筛选有益突变体。本发明方法实现序列相似性较低的两个亲本基因的突变，有效扩展了DNA改组方法的应用；简化小片段回收步骤；实现100％重组并显著降低传统DNA shuffling所存在的重组偏好性，产生更好的基因多样性及重组类型，能够在很少的重组子中筛选到有益突变。采用本发明方法对序列相似性仅为50.9％的甲基对硫磷水解酶的OPHC2和MPH基因进行突变重排，筛选获得高效耐热的甲基对硫磷水解杂合酶。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
