Provided is a method for preparing a CKO/KI animal model by using Cas9 technology. The method uses a Cas9 protein expressed and purified in vitro, a high-efficiency sgRNA screened by an sgRNA cleavage efficiency test performed on embryos in advance, and a single stranded DNA as targeting vectors； the three targeting vectors are mixed and then subjected to embryo injection and transplantation； mice born after transplantation are marked F0 and the genotype identification of F0 is carried out； sexually mature F0 with the correct genotype identification are bred, and the offspring mice thereof are marked F1； and F1 mice are analyzed and verified, and F1 mice with the correct genotype verification are considered to be the prepared CKO/KI animal model.Procédé de préparation d'un modèle animal CKO/KI à l'aide de la technologie Cas9. Le procédé utilise une protéine Cas9 exprimée et purifiée in vitro, un ARNsg à haut rendement criblé par un test d'efficacité de clivage de ARNsg réalisé sur des embryons à l'avance, et un ADN monocaténaire en tant que vecteurs de ciblage； les trois vecteurs de ciblage sont mélangés puis soumis à une injection et une transplantation d'embryon； des souris nées après transplantation sont marquées F0 et l'identification de génotype de F0 est effectuée； F0 les spécimens F0 sexuellement matures possédant l'identification de génotype correcte sont croisés, et les spécimens de leur descendance marqués F1； puis les souris F1 sont analysées et vérifiées, et les souris F1 avec la vérification de génotype correcte sont considérées comme étant le modèle animal CKO/Kl préparé.提供了一种应用Cas9技术制备CKO/KI动物模型的方法。该方法采用体外表达纯化的Cas9蛋白、预先用胚胎进行sgRNA切割效率测试筛选出的高效率sgRNA、以及单链DNA作为打靶载体，将三者混合后进行胚胎注射及移植，移植后生出的小鼠标记为F0，将F0进行基因型鉴定，对已经性成熟且基因型鉴定正确的F0进行配繁，其后代小鼠标记为F1，对F1小鼠进行分析验证，基因型验证正确的F1小鼠即为制备的CKO/KI动物模型。
