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猪带绦虫重组乳酸乳球菌分泌型表达系统的构建和鉴定方法
- 专利权人:
- 遵义医学院
- 发明人:
- 周必英,孙俊超,李想,罗波,江楠
- 申请号：
- CN201710661813.9
- 公开号：
- CN107217056A
- 申请日:
- 2017.08.04
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 刘创先
- 摘要：
- 本发明公开了猪带绦虫重组乳酸乳球菌分泌型表达系统的构建和鉴定方法，包含基因合成和引物设计、重组质粒pMG36e‑SP‑TSOL18的构建及鉴定、猪带绦虫重组pMG36e‑SP‑TSOL18/L.lactis的构建及鉴定和蛋白表达鉴定等步骤。以乳酸乳球菌MG1363为宿主系统进行基因优化，合成目的基因SP‑TSOL18，双酶切连接至pMG36e载体，构建胞内型表达载体pMG36e‑SP‑TSOL18，再将其电穿孔转化至L.lactis MG1363，成功构建猪带绦虫乳酸乳球菌表达系统pMG36e‑SP‑TSOL18/L.lactis MG1363。进行PCR鉴定、SDS‑PAGE和Western blot分析SP‑TSOL18在胞内与胞外均有目标蛋白表达，通过AKTA蛋白纯化鉴定及稳定性分析，pMG36e‑SP‑TSOL18质粒在L.lactis MG1363中连续传代20代，有较好的遗传稳定性，为猪囊尾蚴病疫苗的开发与利用提供了有力的参考依据。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
