Nikitin Dmitrij Valerievich (RU),Никитин Дмитрий Валериевич (RU)
申请号：
RU2018113518
公开号：
RU0002692552C1
申请日:
2018.04.13
申请国别(地区):
RU
年份:
2019
代理人:
摘要：
FIELD: biology.SUBSTANCE: invention relates to genetics and molecular biology and concerns a method for obtaining translocants between any loci belonging to different chromosomes in cells of budding yeast Saccharomyces cerevisiae. Disclosed is a method of producing site-directed translocations in eucaryotic cells of budding yeast Saccharomyces cerevisiae, consisting in lithium-acetate transformation of ura3Δ0/ura3Δ0 cells by a translocation cassette carrying a URA3 gene flanked by homology regions of more than 30 base pairs to two different chromosomes. Homology regions define a cartridge integration point. Correctness of the translocation is checked during the PCR reaction with the primers flanking the regions of homology of the used cartridge, and sequencing the obtained PCR product.EFFECT: disclosed is a method for producing site-directed translocations in Saccharomyces cerevisiae cells.1 cl, 2 dwg, 1 exИзобретение относится к области генетики и молекулярной биологии и касается способа получения транслокантов между любыми локусами, принадлежащими различным хромосомам, в клетках почкующихся дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Предложен способ получения сайт-направленных транслокаций в эукариотических клетках почкующихся дрожжей Saccharomyces cerevisiae, заключающийся в литиево-ацетатной трансформации ura3Δ0/ura3Δ0 клеток кассетой для транслокации, несущей ген URA3, фланкированный областями гомологии более 30 п.н. к двум разным хромосомам. Районы гомологии определяют место интеграции кассеты. Корректность транслокации проверяется в ходе реакции ПЦР с праймерами, фланкирующими области гомологии используемой кассеты, и секвенированием полученного ПЦР продукта. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.
