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用于高等真菌基因中断的方法
- 专利权人:
- 上海交通大学
- 发明人:
- 肖晗,秦浩,钟建江
- 申请号：
- CN201610794735.5
- 公开号：
- CN107779466A
- 申请日:
- 2016.08.31
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 王毓理`王锡麟
- 摘要：
- 一种用于高等真菌基因中断的方法，通过将含有密码子优化的Cas9基因的表达载体转入单倍体灵芝(Ganoderma lucidum，CGMCC NO.5.26)中，获得了可稳定表达Cas9蛋白的灵芝菌株；然后将经体外转录的gRNA转入此表达Cas9蛋白的灵芝菌株中，通过gRNA识别靶向基因，实现靶向基因的特定位点的中断，并以U6snRNA启动子介导gRNA内源转录，同样使靶向基因的特定位点中断。本发明以灵芝作为模式物种，提供了包含密码子优化的Cas9基因的表达载体和宿主细胞，提供了通过外源转录合成gRNA或内源U6small nuclear RNA(U6 snRNA)启动子转录合成gRNA两种方式构建CRISPR/Cas9基因组编辑的方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
