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东北红豆杉悬浮细胞的玻璃化超低温保存方法
- 专利权人:
- 吉林大学
- 发明人:
- 王淑杰,王胡军,李瞳,李纯,王庆,范心乐,王鹤,王薇,乔建磊
- 申请号:
- CN201710133423.4
- 公开号:
- CN106900698A
- 申请日:
- 2017.03.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 王淑秋
- 摘要:
- 本发明涉及一种东北红豆杉悬浮细胞的玻璃化超低温保存方法,该方法包括下述步骤:取第7次继代培养的东北红豆杉细胞,在B5液态培养基中悬浮培养11~13d后进行预培养1.5~2.5d;预培养基由B5液体培养基中加入蔗糖和二甲基亚砜混合制成;将悬浮细胞从预培养基中分离出来,在60%的玻璃化保护剂PVS4中预处理25~35min;将悬浮细胞加入预冷到0℃的100%PVS4中,并在0℃脱水35~45min后将悬浮细胞加入预冷到0℃的新鲜100%PVS4液体,然后转移到冷冻管中,投入液氮冷冻。本发明具有存活率高、所需设备简单、处理步骤方便和重复性好等优点,细胞保存长期安全稳定,成本低。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/