Daniel J. GARRY,Mary G. GARRY,Naoko KOYANO-NAKAGAWA
申请号:
MX2018000071
公开号:
MX2018000071A
申请日:
2016.06.30
申请国别(地区):
MX
年份:
2018
代理人:
摘要:
Described herein is a method for producing a chimeric non-human animal expressing a human NKX2-5, HANDII, TBX5 gene or a combination thereof gene comprising: a) generating a NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human animal cell, wherein both copies of the non-human NKX2-5, HANDII, TBX5 gene or combination thereof carry a mutation that prevents production of functional NKX2-5, HANDII, TBX5 protein or combination thereof in said non-human animal; b) creating a NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human blastocyst by somatic cell nuclear transfer comprising fusing a nucleus from said NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human animal cell of a) into an enucleated non-human oocyte and activating said oocyte to divide so as to form an NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof null non-human blastocyst; c) introducing human stem cells into the NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination null non-human blastocyst of b); and d) implanting said blastocyst from c) into a pseudopregnant surrogate non-human animal to generate a chimeric non-human animal expressing human NKX2-5, HANDII, TBX5 or combination thereof.Se describe en la presente un método para producir un animal quimérico no humano que expresa un gen humano de NKX2- 5, HANDII, TBX5 o una combinación de los mismos que comprende: a) generar un NKX2-5, HANDII, TBX5 o una combinación de los mismos de una célula animal no humana, en la que ambas copias del gen NKX2-5, HANDII, TBX5 no humano o una combinación de las mismas llevan una mutación que impide la producción de proteína funcional NKX2-5, HANDII, TBX5 o una combinación de las mismas en el animal no humano; b) crear un NKX2-5, HANDII, TBX5 o una combinación de los mismos blastocito no humano mediante transferencia nuclear de células somáticas que comprende fusionar un núcleo del NKX2- 5, HANDII, TBX5 o una combinación de las mismas células animales no humanas de a) en un no nucleado enucleado ovocito humano y activación del