本发明公开了一种玫瑰石斛组织培养方法,包括玫瑰石斛种子培养萌发成原球茎,壮苗培养,诱导生根,炼苗四个步骤,所述玫瑰石斛种子培养萌发成原球茎中使用的种子培养基包含以下组分:硝酸钾1600mg/L、硝酸铵1250mg/L、硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙440mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、硫酸锰16.9mg/L、硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、钼酸钠0.25mg/L、Na2‑EDT A 37.3mg/L、硫酸亚铁21.8mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100mg/L、NAA 0.5‑2.0mg/L、6‑BA 0.5‑3.0mg/L、马铃薯100000mg/L、碳粉250mg/L、蔗糖30000mg/L、水解乳蛋白700mg/L、琼脂4500mg/L。该方法的玫瑰石斛种子萌发率高,在90%以上,繁殖率得到极大的提高。