FEDERALNOE AGENTSTVO NAUCHNYKH ORGANIZATSIJ (FANOROSSII) FEDERALNOE GOSUDARSTVENNOE BJUDZHETNOE UCHREZHDENIE NAUKI INSTITUT BIOORGANICHESKOJ KHIMII IM. AKADEMIKOV M.M. SHEMJAKINA I JU.A. OVCHINNIKOVA
发明人:
LEBEDEV VADIM GEORGIEVICH,Лебедев Вадим Георгиевич,SHESTIBRATOV KONSTANTIN ALEKSANDROVICH,Шестибратов Константин Александрович
申请号：
RU2013139702/10
公开号：
RU0002582263C2
申请日:
2013.08.28
申请国别(地区):
RU
年份:
2016
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention represents method of producing genetically modified wood plants, which includes: a) production and preparation to inoculation of plant explants strain A. tumefaciens containing intended for introduction into plant selective marker and/or useful genes b) production and preparation to strain A. tumefaciens plant explants c) inoculation of explants strain A. tumefaciens in liquid medium d) co-cultivation of explants with agrobacteria on medium without selective agents and bacteriostatic antibiotics e) placing of explants on medium containing selective agents and bacteriostatic antibiotics to obtain regenerants directly from tissue explants or through stage of callus e) extraction of obtained at selective medium regenerants by testing for presence of full-size copy of target gene, where co-cultivation step is terminated if observing in nutrient medium for one layer of filter paper with pore size of 5-8 mcm colonies agrobacteria in amount of 10-20 % of plant explants.EFFECT: invention enables to determine optimum period of co-cultivation and increase frequency of genetic transformation of plants.2 cl, 4 dwg, 1 tbl, 10 exИзобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и представляет собой способ получения генетически модифицированных древесных растений, включающий: а) получение и подготовку к инокуляции растительных эксплантов штамма А. tumefaciens, содержащего предназначенный для введения в растение селективный, маркерный и/или полезный гены б) получение и подготовку к инокуляции штаммом A. tumefaciens растительных эксплантов в) инокуляцию эксплантов штаммом A. tumefaciens в жидкой среде г) кокультивацию эксплантов с агробактериями на среде без селективных агентов и бактериостатических антибиотиков д) помещение эксплантов на среду, содержащую селективные агенты и бактериостатические антибиотики, с целью получения регенерантов непосредственно из тканей эксплантов или через стадию каллуса е) отбор полученных на сел
