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一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 刘正飞,张美美,陈焕春,王昕
- 申请号:
- CN201410323568.7
- 公开号:
- CN105238764A
- 申请日:
- 2014.07.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用,步骤是:A、Intron上下游同源臂的PCR扩增;B、转染载体的构建。将Intron基因上下游同源臂片段通过分子克隆技术克隆至pcDNA3.1(+)载体上;C、PRV-ΔIntron重组病毒的构建与鉴定;D、PRV-ΔIntron重组病毒体外培养生物学特性。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株接种PK-15细胞;E、动物实验。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株感染Balb/c小鼠,Intron的缺失导致其毒力大大降低。该毒株表达miRNA的区域缺失,丧失了对宿主和自身蛋白质编码基因的调控作用,导致毒力下降,具有开发成为新型疫苗的潜在价值。方法易行,操作简便,缺失区域遗传稳定,不会返强。用于制备新型伪狂犬病疫苗,预防和控制猪伪狂犬病。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/