一种定点敲除几丁质合成酶基因的方法

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专利权人:

四川农业大学

发明人:

祁鹏飞,张亚洲,江千涛,魏育明,郑有良

申请号：

CN201610130671.9

公开号：

CN105936911A

申请日:

2016.03.08

申请国别(地区):

中国

年份:

2016

代理人:

裴娜

摘要：

本发明公开了一种快速且高效定点敲除新型几丁质合成酶基因的方法，新型几丁质合成酶基因的DNA序列和cDNA序列如SEQ ID NO：1；本方法运用冻融法质粒转农杆菌AGL‑1；采用10000个禾谷镰刀菌分生孢子和OD₆₀₀为0.75的农杆菌在0.45μ尼龙膜上共培养；通过构建改良的同源重组质粒，缩短了载体构建时间；该敲除方法可大大缩短基因敲除时间和提高同源重组率提高至93.3％。并通过测定敲除突变体几丁质合成酶含量，验证了第八类几丁质合成酶基因的功能为调控几丁质合成酶合成。本发明首次在禾谷镰刀菌中发现了新一类暨第八类几丁质合成酶基因，为小麦抗赤霉病提供了新的靶标基因，同时为功能基因组学的研究提供了一种快速且高效的基因敲除方法。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/