本发明涉及一种一种虎γ干扰素及其表达基因、制备方法和应用,属于基因工程技术领域。该虎γ干扰素包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。上述虎γ干扰素是通过分离培养虎外周血淋巴细胞,ConA诱导其分泌γ干扰素,从淋巴细胞中克隆获得的虎γ干扰素。并且为了更好地利用基因工程技术来开发重组虎干扰素γ制剂,本发明中,还将去除信号肽序列的虎干扰素γ基因序列根据毕赤酵母的偏嗜性进行密码子优化,插入到pPIC9K载体,构建成能分泌表达干扰素γ蛋白的重组表达载体,然后将其导入高效表达系统‑毕赤酵母中。培养毕赤酵母,表达虎γ干扰素蛋白,为后续制备用于增强虎免疫能力和/或抵抗病原微生物感染的药物中提供坚实的基础。