Disclosed are a heterodimeric fusion protein, a preparation therefor, and an application thereof. A heavy chain and a light chain of a first antigen binding domain Fab are respectively fused to an N terminal end of two Fcs, and on this basis, a second antigen binding domain, scfv, Fab2, Fv, a nano-sized antibody or a physiologically active peptide is fused to an N terminal end of the Fab or a C terminal end of the Fcs. The heterodimeric fusion protein prepared by the above method has the following benefits: each antigen binding domain in the molecules thereof has the same structure as the protein itself, such that the activity and the pharmaceutical properties of the antigen binding domain can be well retained; at least one antigen binding domain can bind to an antigen monovalently; and since an Fc fragment is retained, the heterodimeric fusion protein of the present invention has a prolonged half-life.La présente invention concerne une protéine de fusion hétérodimère, une préparation correspondante et une utilisation associée. L'invention consiste à fusionner respectivement une chaîne lourde et une chaîne légère d'un premier domaine Fab de liaison à l'antigène à une extrémité N-terminale de deux Fc, et sur cette base, un second domaine de liaison à l'antigène, scfv, Fab2, Fv, un anticorps de taille nanométrique ou un peptide physiologiquement actif est fusionné à une extrémité N-terminale du Fab ou une extrémité C-terminale des Fc. La protéine de fusion hétérodimère préparée par le procédé selon l'invention présente les avantages suivants : chaque domaine de liaison à l'antigène dans ses molécules a la même structure que la protéine elle-même, de telle sorte que l'activité et les propriétés pharmaceutiques du domaine de liaison à l'antigène peuvent être bien conservées ; au moins un domaine de liaison à l'antigène peut se lier à un antigène de manière monovalente ; et étant donné qu'un fragment Fc est retenu, la protéine de fusion hétérodimère selon la présente inv