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一种用于细胞培养的组织块的冷冻保存方法
- 专利权人:
- 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 发明人:
- 谭秀文,游伟,靳青,刘桂芬,刘晓牧,宋恩亮,万发春
- 申请号:
- CN201310465591.5
- 公开号:
- CN103478118B
- 申请日:
- 2013.10.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 韩百翠
- 摘要:
- 本发明公开了一种用于细胞培养的组织块的冷冻保存方法。它先将组织匀浆处理成乳糜状,然后加入冷冻液混匀,分装到含有蔗糖、DMSO和谷胱甘肽的冷冻管中,之后放置在冷冻保存盒中-80℃超低温冰箱过夜,最后放入液氮中长期保存。解冻时依次经过解冻液、培养液离心洗涤,之后组织块可直接接种培养或经蛋白酶消化成单个细胞后培养。本发明先将组织用匀浆机处理成乳糜状,有利于冷冻保护剂渗透进入组织细胞内,使细胞内水分脱出;同时冷冻液中添加的非渗透性保护剂蔗糖,也有利于组织细胞内的水分脱出;加入抗氧化物质谷胱甘肽,有助于减轻氧自由基对细胞内蛋白的破坏作用。解冻后组织块在培养瓶内直接接种,贴壁存活率在96%以上。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/