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一种超折叠绿色荧光蛋白介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达方法
- 专利权人:
- 湖北大学
- 发明人:
- 张贞,马立新,卞璐,易犁
- 申请号：
- CN201611074253.9
- 公开号：
- CN106591343A
- 申请日:
- 2016.11.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 丁齐旭
- 摘要：
- 本发明提出一种超折叠绿色荧光蛋白介导异源蛋白在大肠杆菌中胞外分泌表达的方法。步骤为：1)构建以超折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)作为分泌标签的分泌表达载体pET23a/sfGFP‑GFP；2)构建异源蛋白基因重组表达载体；3)分别转化融合表达载体至大肠杆菌感受态细胞Rosetta Blue，获得重组菌株；4)表达与培养以及功能验证；5)重组菌株高密度发酵。本发明利用了超折叠绿色荧光蛋白的分泌特点，无需通过信号肽介导，实现异源蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中胞外分泌表达，简化操作过程，自分泌能力强，标签蛋白对目的蛋白功能无影响，能够快速优化表达条件，提高了目的蛋白的得率，适合规模化生产。拓展了sfGFP的应用领域并为异源蛋白在大肠杆菌中实现胞外分泌表达提供了一个新方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
