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基于全爪螨几丁质基因的双靶标转基因载体的制备方法
- 专利权人:
- 冉春
- 发明人:
- 冉春,张云飞,刘浩强,陈飞,李鸿筠,李俊丽,李晓姣,岳建书
- 申请号:
- CN201210492338.4
- 公开号:
- CN103014059A
- 申请日:
- 2012.11.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种同时应用2种几丁质酶基因的方法。从柑橘全爪螨转录组数据库鉴定出2条几丁质酶基因Unigene10731和Unigene7021,进行真实性检测后,将选出的两个基因在NCBI上进行比对,找出保守序列,根据多基因大片段构建策略将两个基因拼接成一个多基因片段,将Unigene10731与Unigene7021拼接在一起作为一个多基因。设计含有酶切位点的引物,将正、反向多基因几丁质酶目的片段先后插入到载体内含子两端,从而构成反向互补发卡结构的RNAi干扰载体“PFGC+Ug10731/Ug7021”,将载体转载于农杆菌中对柑橘苗木进行侵染。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/