The present invention provides a nucleic acid construct comprising the following structure: A-X-B in which X is a nucleic acid sequence which encodes a cleavage site； and A and B are nucleic acid sequences encoding a first and a second chimeric antigen receptor (CAR), each CAR comprising: (i) an antigen-binding domain； (ii) a spacer (iii) a trans-membrane domain； and (iv) an endodomain wherein the antigen binding domains of the first and second CARs bind to different antigens； wherein one of the first or second CARs is an activating CAR comprising an activating endodomain and the other CAR is an inhibitory CAR comprising a ligation-off inhibitory endodomain； and wherein: (a) the first and/or second CAR comprises an intracellular retention signal； and/or (b) the signal peptide of the first or second CAR comprises one or more mutation(s) such that it has fewer hydrophobic amino acids.La présente invention concerne une structure d'acide nucléique comprenant la structure suivante : A – X - B dans laquelle X représente une séquence d'acide nucléique qui code pour un site de clivage ； et A et B représentent des séquences d'acide nucléique codant pour des premier et second récepteurs d'antigènes chimères (CAR), chaque CAR comprenant : (i) un domaine de liaison à l'antigène ； (ii) un espaceur ； (iii) un domaine transmembranaire ； et (iv) un endodomaine dans lequel les domaines de liaison à l'antigène des premier et second CAR se lient à différents antigènes ； le premier CAR ou le second CAR est un CAR d'activation comprenant un endodomaine d'activation et l'autre CAR est un CAR inhibiteur comprenant un endodomaine inhibiteur de la dé-ligature ； et : (a) le premier CAR et/ou le second CAR comprenant un signal de rétention intracellulaire ； et/ou (b) le peptide signal du premier CAR ou du second CAR comprenant une ou plusieurs mutations(s) de sorte qu'il présente moins d'acides aminés hydrophobes.
