本发明公开了一种鉴定烟草低镉突变体杂交后代基因型的引物对,其特征在于:所述引物对的引物1为Seq ID No.1所示序列,引物2为Seq ID No.2所示序列,Seq ID No.1:5’GAAATAGAGGGTGATAGTTTCA 3’;Seq ID No.2:5’CATTTCAGCGTAATGCAGAATTA 3’。利用本发明所述的基因特异性引物结合HRM技术可高通量、快速对NtHMA4突变材料杂交后代的大量分离群体进行筛选,准确区分野生型、纯合突变型及杂合突变型材料,进而鉴定出含烟草NtHMA4突变基因的低镉烟草材料。