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猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 发明人:
- 刘新生,张永光,王永录,方玉珍,周鹏,肖帅
- 申请号:
- CN201710984675.8
- 公开号:
- CN107557497A
- 申请日:
- 2017.10.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 席勇
- 摘要:
- 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR试剂盒及检测方法,试剂盒包括特异性引物和探针,引物序列如下:上游引物:5'‑ACGTCGTAAGACCCAGCATC‑3';下游引物:5'‑CCCACCTGAAAGTTGCTCTC‑3';探针的序列为:5'‑FAM‑GTATGGCTGATCCTCGCATCATGGC‑BHQ1‑3';扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段648bp,本发明建立的TaqMan实时荧光定量PCR对PDCoV的最低检测限度为26.6copies/μL,而对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及口蹄疫病毒的检测结果均为阴性;本发明检测PDCoV的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、批间和批内重复性好。利用本发明对194份临床猪粪便样品进行检测,结果显示PDCoV阳性率为22.1%,高出常规RT‑PCR对该临床猪粪便样品检测的阳性率11.9%近1倍。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/