家猪肿瘤坏死因子突变体的构建及蛋白表达纯化方法
- 专利权人:
- 南京师范大学
- 发明人:
- 张双全,朱善元,杨林,赵东伟
- 申请号：
- CN201410803110.1
- 公开号：
- CN104561022B
- 申请日:
- 2014.12.22
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及家猪肿瘤坏死因子(TNF‑α)基因定点突变与蛋白制备方法和应用，本发明所述的猪肿瘤坏死因子(TNF‑α)的一个突变体基因，它具有SEQ ID NO.2所示的序列。此突变体基因翻译蛋白氨基酸序列具有SEQ ID NO.3所示的序列，将此突变体连接到pET28a原核表达质粒中并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，诱导表达，Ni+‑NTA柱纯化后得到的重组蛋白His6‑PmTNF‑α，CCK‑8、LDH检测等实验均证明该突变体蛋白与TNF‑α野生型蛋白相比，能够明显增强对L929细胞的细胞毒活性并降低对正常细胞L02的毒副作用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
