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一种基于RMCE技术的转基因方法
- 专利权人:
- 赛业（苏州）生物科技有限公司
- 发明人:
- 郑敦武,黎妃凤,王正龙,苏翠,俞晓峰
- 申请号：
- CN201510459245.5
- 公开号：
- CN105063087A
- 申请日:
- 2015.07.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王艳
- 摘要：
- 本发明公开了一种基于RMCE技术的转基因方法，包括以下步骤：以Rosa26载体为框架，Lox2272位点或Attp70位点等构建载体；载体测序正确后，电转到ES细胞中，用含有抗生素的培养基进行筛选，获得阳性ES细胞；PCR或Southern Blot再次验证；将带有Flp重组酶的质粒转到阳性ES细胞中，获得阳性ES细胞；将验证正确的阳性ES细胞显微注射到小鼠的囊胚中，而后转移至代孕母鼠中，获得含有荧光标记的RMCE工具鼠。本发明是由RMCE与重组酶技术融合而来，其既有RMCE技术的优点，又能实现基因的定点插入，试验周期短、效率高、同时也减少了基因的随机插入带来的毒性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
