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小鼠脑组织蛋白质组分析的样品制备方法
- 专利权人:
- 中国科学院近代物理研究所
- 发明人:
- 吴庆丰,李强,叶飞,金晓东
- 申请号:
- CN201510206905.9
- 公开号:
- CN104880546A
- 申请日:
- 2015.04.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 李艳华
- 摘要:
- 本发明涉及一种小鼠脑组织蛋白质组分析的样品制备方法,该方法包括以下步骤:⑴心尖灌流替换血液:取小鼠一只麻醉后进行缓慢心尖灌流,待肝脏呈灰白色时停止并取出脑组织;⑵蛋白提取:将脑组织研磨成粉末状后加入预冷的Tris缓冲液,经超声处理、摇床孵育、离心得蛋白提取液Ⅰ;⑶热处理增加蛋白溶解性:将蛋白提取液Ⅰ与热处理液混合后处理5min,经离心得蛋白提取液Ⅱ;⑷沉淀去脂:将蛋白提取液Ⅱ加入到预冷的去脂沉淀液CUS中,经沉淀、离心、洗涤、吹干,即得纯化蛋白粉末;⑸蛋白重溶:将纯化蛋白粉末加入到尿素蛋白裂解液中,经离心得蛋白质组样品。本发明可经济、高效去除小鼠脑组织血液、脂类影响,并增加蛋白样品溶解性。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/