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一种小鼠Rtn4-A/B基因敲除方法
- 专利权人:
- 中国人民解放军第二军医大学
- 发明人:
- 李强,胥武剑,朱莹
- 申请号：
- CN201310175592.6
- 公开号：
- CN103266102B
- 申请日:
- 2013.05.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 黄志达
- 摘要：
- 本发明涉及一种小鼠Rtn4-A/B基因敲除方法，包括：（1）将与小鼠Rtn4-a/b基因同源的5’和3’臂、标记有NEO抗性基因的表达框敲入BAC打靶载体；将得到的Rtn4-A/B-KO质粒DNA用Not I线性化，消化过夜，等体积酚氯仿、氯仿处理，无水乙醇沉淀，用无菌PBS将线性化后的质粒DNA重悬备用；（2）使用线性化后的Rtn4-A/B-KO DNA对ES细胞进行细胞转染；抽提抗性克隆的基因组DNA，进行跨5’臂或3’臂和插入片段的长链PCR鉴定，即可。本发明有效敲除Rtn4-A、B1、B2的基因表达，而对其他Rtn4亚型表达无明显影响，为深入研究Rtn4-A/B的生物学功能奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
