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一种抗牛病毒性腹泻病毒蛋白E2特异性IgY的制备方法
- 专利权人:
- 西北农林科技大学
- 发明人:
- 张小莺,王媛,任昊,江雪梅
- 申请号：
- CN201410603881.6
- 公开号：
- CN104356232A
- 申请日:
- 2014.10.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒E2蛋白特异性IgY的制备方法，包括以下步骤：(1)根据BVDV-E2基因序列，设计一对引物，PCR扩增BVDV-E2基因，连接至pMD18T，转化DH5α感受态细胞，经蓝白斑筛选后，提取质粒，酶切分析，阳性质粒测序，对测序结果分析；(2)E2蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化；(3)抗E2-IgY抗体的制备：纯化的E2蛋白免疫产蛋鸡，使用PEG6000沉淀法提取特异性IgY抗体，并进行SDS-PAGE分析，ELISA效价监测，Western blotting特异性分析。本发明提取的抗E2-IgY抗体可较好地结合E2蛋白，而与降解片段无交叉反应。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
