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筛选具有将大量存在的人参皂苷转化为稀有人参皂苷的能力的菌株的方法
- 专利权人:
- 中国科学院微生物研究所
- 发明人:
- 梁朝宁,熊丹丹,唐双焱
- 申请号:
- CN201310246807.9
- 公开号:
- CN104232671A
- 申请日:
- 2013.06.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 关畅
- 摘要:
- 本发明公开了一种筛选具有将大量存在的人参皂苷转化为稀有人参皂苷的能力的菌株的方法。本发明提供的方法包括如下步骤:(1)将基因甲插入表达质粒后转化宿主菌,得到野生菌;将基因甲作为模板进行易错PCR,将易错PCR的产物插入表达质粒后转化所述宿主菌,得到的所有单菌落组成突变菌株库;基因甲为已知的具有将大量存在的人参皂苷转化为稀有人参皂苷的能力的蛋白质的编码基因;(2)将野生菌和突变菌株库中的每个菌分别进行培养并收集发酵产物;(3)将所述发酵产物作用于所述大量存在的人参皂苷,得到反应液;(4)采用DNS法筛选;(5)进行(a)和/或(b);(a)薄层层析;(b)HPLC。本发明具有高效、快速、具有高通量等优点。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/