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一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用
- 专利权人:
- 中国农业科学院油料作物研究所
- 发明人:
- 魏文辉,李晨
- 申请号:
- CN201410189586.0
- 公开号:
- CN105087617A
- 申请日:
- 2014.05.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用,利用Sac I和Sma I内切酶切除pBI121载体中的GUS基因。设计特定引物lox66-Cre-5’和Sac I-cre-3’,利用LA-Taq酶扩增J20(Pc-cre,包含有Cre基因序列)获得lox66-Cre片段。利用T4连接酶将lox66-Cre片段连入除去GUS基因的pBI121载体,经鉴定40号克隆为所需要的阳性克隆,命名为Cre40,Cre40为含有CRE/loxP位点特异性重组系统的表达载体。通过根癌农杆菌介导,将表达载体Cre40转化油菜品种中油821,获得了经过PCR检测为阳性的油菜转基因植株,转基因植株有性杂交试验证明该载体具有位点特异性重组功能。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/