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一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用
专利权人:
中国农业科学院油料作物研究所
发明人:
魏文辉,李晨
申请号:
CN201410189586.0
公开号:
CN105087617A
申请日:
2014.05.07
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
摘要:
本发明公开了一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用,利用Sac I和Sma I内切酶切除pBI121载体中的GUS基因。设计特定引物lox66-Cre-5’和Sac I-cre-3’,利用LA-Taq酶扩增J20(Pc-cre,包含有Cre基因序列)获得lox66-Cre片段。利用T4连接酶将lox66-Cre片段连入除去GUS基因的pBI121载体,经鉴定40号克隆为所需要的阳性克隆,命名为Cre40,Cre40为含有CRE/loxP位点特异性重组系统的表达载体。通过根癌农杆菌介导,将表达载体Cre40转化油菜品种中油821,获得了经过PCR检测为阳性的油菜转基因植株,转基因植株有性杂交试验证明该载体具有位点特异性重组功能。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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