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一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
- 专利权人:
- 江南大学
- 发明人:
- 孙付保,白仁惠,张震宇,许银彪,王春迪
- 申请号：
- CN201510918697.5
- 公开号：
- CN105420269A
- 申请日:
- 2015.12.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法，具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化，构建了pPIC9K-eg2表达载体，并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外，从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列，通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体，以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主，通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明，共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高，其中OD600值提高7.2％，酶活提高2.2％。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
