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黄鳝雌激素受体α基因、编码蛋白及酶联免疫检测方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 丁炜东,邴旭文,曹丽萍,曹哲明
- 申请号：
- CN201410180865.0
- 公开号：
- CN103965348B
- 申请日:
- 2014.04.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 邓唯`唐循文
- 摘要：
- 本发明采用RT-PCR方法获得黄鳝性腺中ERα序列，选择其抗原性较强的氨基酸序列相对应的cDNA序列作为模板克隆到长约945bp的序列，并将其克隆到pMAL-c2x表达载体中，通过IPTG诱导，Amylose-sepharose柱的纯化，获得了较纯的具有免疫活性的重组蛋白，采用Factor Xa蛋白酶切、进一步纯化后，获得了可作为免疫原的ERα表达蛋白。免疫小鼠后，获得较高滴度的抗血清，并初步进行了免疫组化研究，表明该抗血清能特异与黄鳝性腺中的ERα蛋白结合，在卵母细胞膜上呈阳性反应，为进一步研究黄鳝性别发展中雌激素及其ERα等作用打下了基础。本发明还以此抗体为基础制备了ELISA检测试剂盒。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
