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In vivo incorporation of alkynyl amino acids to proteins in eubacteria
专利权人:
The Scripps Research Institute
发明人:
Deiters, Alexander,Schultz, Peter
申请号:
ES14167563
公开号:
ES2666693T3
申请日:
2005.09.20
申请国别(地区):
ES
年份:
2018
代理人:
摘要:
A method of producing a composition comprising an antibody or an antibody fragment, in which the antibody or antibody fragment comprises at least one unnatural alkynyl amino acid, wherein the method comprises incorporating at least one unnatural alkynyl amino acid into the antibody or the antibody fragment at a specified position in vivo in a eubacterial cell, a cell comprising an orthogonal aminoacyl-tRNA synthetase (O-RS) that acts in the cell, wherein the O-RS is at least 90% identical to the tyrosyl-tRNA synthetase of wild-type Methanococcus jannaschii having the amino acid sequence SEQ ID NO: 2 and the O-RS has an amino acid sequence comprising: (a) alanine, histidine, serine or threonine in a position that corresponds to position 32 of SEQ ID NO: 21; (b) alanine, leucine, proline or serine in a position corresponding to position 158 of SEQ ID NO: 21; and (c) alanine, histidine, threonine or proline in a position corresponding to position 162 of SEQ ID NO: 21; and wherein the O-RS preferably aminoacylates an orthogonal tRNA (O-tRNA) with the unnatural amino acid alkynylUn método para producir una composición que comprende un anticuerpo o un fragmento de anticuerpo, en el que el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo comprenden al menos un alquinil aminoácido no natural, en donde el método comprende incorporar al menos un alquinil aminoácido no natural en el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo en una posición especificada in vivo en una célula eubacteriana, célula que comprende una aminoacil-ARNt sintetasa ortogonal (O-RS) que actúa en la célula, en donde la O-RS es al menos un 90 % idéntica a la tirosil-ARNt sintetasa de Methanococcus jannaschii de tipo silvestre que tiene la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 2 y la O-RS tiene una secuencia de aminoácidos que comprende: (a) alanina, histidina, serina o treonina en una posición que corresponde a la posición 32 de SEQ ID NO: 21; (b) alanina, leucina, prolina o serina en una posición que corresponde a la po
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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