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一种橡胶草遗传转化方法
专利权人:
中国热带农业科学院热带生物技术研究所
发明人:
彭存智,常丽丽,仝征,王丹,徐兵强
申请号:
CN201911045196.5
公开号:
CN110669783A
申请日:
2019.30.10
申请国别(地区):
CN
年份:
2020
代理人:
摘要:
本发明提供一种橡胶草遗传转化方法,包括:(1)取新疆橡胶草种质的幼嫩叶片,切割处理,放于:MS+1.5~1.6mg/L6‑BA+0.1mg/LNAA+20g/L蔗糖,pH5.8芽诱导培养基中培养;50天后,挑选出适宜组培的橡胶草优异种质;转至:1/2MS+20g/L蔗糖,pH5.8的生根培养基,成为再生橡胶草组培幼苗;(2)取幼苗叶片切割处理,在芽诱导培养基上预培养2天;(3)加入农杆菌侵染液浸染后,转至芽诱导培养基中,黑暗共培养3天;转至含400mg/L Car的芽诱导培养基培养一周;转至MS+1.5~1.6mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA+20g/L蔗糖+400mg/L Car和8~10mg/L Hyg,pH5.8筛选培养基上,诱导抗性芽的再生;转至1/2MS+20g/L蔗糖+400mg/L Car和8~10mg/L Hyg,pH5.8新的生根培养基上,得到橡胶草抗性再生植株;本发明的橡胶草遗传转化方法,抗性再生芽诱导率>30%,转基因再生苗植株畸形率低,对转基因橡胶草阳性检出率>90%。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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