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一种快速诱导枣同质多倍体的方法
- 专利权人:
- 河北农业大学
- 发明人:
- 刘孟军,王娜
- 申请号:
- CN200910227922.5
- 公开号:
- CN101926283A
- 申请日:
- 2009.12.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 摘要:
- 一种快速诱导枣同质多倍体的方法,即在枣离体叶片体细胞胚胎发生过程中同时进行秋水仙素诱变,使单细胞胚胎染色体得到加倍而发育成同质四倍体。该方法包括体细胞胚胎诱导和染色体加倍、胚状体发育成熟及同质四倍体的检测筛选。选取生长健壮、苗龄20~30d的枣组培苗叶片,用灭菌过的剪刀垂直叶脉剪切5~8刀。然后正面向上接种于诱导培养基MS+麦芽糖15~25g/L+琼脂3.0~5.0g/L+TDZ5.0~10.0mg/L+AgNO31.0~2.0mg/L上,培养基中同时附加秋水仙素15~20mg/L,暗培养40~50天。将枣叶片愈伤组织分化出的胚状体转接到MS+蔗糖40g/L+水解酪蛋白500mg/L的无激素培养基上光照培养,使其发育成体细胞胚苗。体细胞胚苗经过染色体或流式细胞仪检测即可筛选出同质四倍体。以上培养基的pH为5.0~6.0,培养温度25~30℃。该方法避免了嵌合体的出现,省略了分离纯化步骤,可快速获得同质多倍体,对加快枣的多倍体育种进程有重要应用价值。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/